Testes bioquímicos: tipos, para que servem e importância - Ciência - 2023

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As Testes bioquímicos em microbiologia, é um conjunto de testes químicos realizados nos microrganismos presentes em uma amostra para identificá-los; esses microrganismos geralmente são bactérias. Há um grande número de testes bioquímicos disponíveis para um microbiologista.

No entanto, a escolha desses testes é baseada em achados preliminares, como o padrão de coloração de Gram e características de crescimento, que permitem que a bactéria seja atribuída a uma categoria particular. Os testes bioquímicos baseiam-se principalmente nas propriedades metabólicas de cada tipo de bactéria.

Nem todas as bactérias têm as mesmas propriedades, por isso é investigado se elas têm alguma enzima em particular, adicionando o substrato e esperando a reação ocorrer. Normalmente, esta determinação é dada por uma mudança na cor ou no pH do meio de cultura.

Freqüentemente, menos de 15 testes bioquímicos são necessários para a identificação confiável de uma bactéria até o nível de espécie. A realização de mais testes bioquímicos pode aumentar a confiança na identificação.

A maioria desses testes bioquímicos é realizada em soro ou plasma sanguíneo. No entanto, também podem ser realizados em outras secreções biológicas como: urina, líquido cefalorraquidiano, líquido pleural e fezes, entre outros.

Classificação

Os testes bioquímicos podem ser classificados em 3 grupos:

Universal

São os testes que podem ser realizados em qualquer amostra e que orientam o microbiologista nos seguintes testes bioquímicos que devem ser realizados para se obter uma identificação confiável.

Exemplo

O teste da catalase e da oxidase.

Diferenciais

São os testes realizados para identificar os microrganismos presentes na amostra até o nível de espécie.

A identificação é feita com base nos resultados de uma combinação de testes, pois os resultados individuais não são informativos o suficiente para fazer a identificação.

Exemplo

Testes IMViC e testes de utilização de açúcar.

Específico

Eles são testes específicos para um determinado conjunto de espécies ou para subtipo de uma espécie. Esses testes geralmente são feitos para confirmar ou identificar no nível da subespécie. Os testes individuais são informativos em si.

Exemplo

O teste de γ-Glutamil aminopeptidase.

Tipos de testes bioquímicos

O teste de catalase

O teste da catalase é um teste para demonstrar a presença da enzima catalase quebrando o peróxido de hidrogênio em oxigênio e água. Uma pequena quantidade de bactérias é adicionada a uma gota de peróxido de hidrogênio (3%) na lâmina.

O teste da catalase é um teste simples usado por microbiologistas para ajudar a identificar espécies de bactérias e determinar a capacidade de alguns micróbios de quebrar o peróxido de hidrogênio, produzindo a enzima catalase.

Se forem observadas bolhas de oxigênio, isso significa que a bactéria possui a enzima catalase, porque ela catalisa a decomposição do peróxido de hidrogênio em oxigênio e água. O organismo é então considerado positivo para catalase (por exemplo: Staphylococcus aureus).

O teste da oxidase

Este teste é usado para identificar microrganismos que contêm a enzima citocromo oxidase (importante na cadeia de transporte de elétrons). É comumente usado para distinguir entre as famílias Enterobacteriaceae e Pseudomadaceae.

A citocromo oxidase transfere elétrons da cadeia de transporte de elétrons para o oxigênio (o aceptor final de elétrons) e o reduz a água. Doador artificial de elétrons e moléculas aceitadoras são fornecidos no teste de oxidase.

Quando o doador de elétrons é oxidado pela ação da citocromo oxidase, o meio fica roxo escuro e é considerado um resultado positivo. O microorganismo Pseudomonas aeruginosa é um exemplo de uma bactéria oxidase positiva.

Teste de Agar de Manitol Salgado (MSA)

Este tipo de teste é seletivo e diferencial. O MSA selecionará organismos capazes de viver em ambientes com altas concentrações de sal, como as espécies de Estafilococo em contraste com as espécies de Estreptococo, cujo crescimento é inibido nessas condições.

O componente diferencial neste teste é o açúcar manitol. Os organismos capazes de usar o manitol como fonte de alimento irão produzir subprodutos da fermentação, que são ácidos e, portanto, reduzem o pH do meio.

A acidez do meio faz com que o indicador de pH, vermelho de fenol, fique amarelo. Exemplos de espécies de bactérias que podem ser diferenciadas por este método são: Staphylococcus aureus (positivo porque o manitol fermenta) e Staphylococcus epidermidis (negativo porque o manitol não fermenta).

Teste de coagulase

A coagulase é uma enzima que ajuda a coagular o plasma sanguíneo. Este teste é realizado em espécies de bactérias Gram positivas e catalase positivas para identificar Staphylococcus aureus (coagulase positiva). Na verdade, a coagulase é um fator de virulência dessa espécie bacteriana.

A formação de coágulos em torno de uma infecção causada por essa bactéria provavelmente a protege da fagocitose. Este teste é muito útil quando você deseja diferenciar entre Staphylococcus aureus de outras espécies de Estafilococo que são coagulase negativos.

O teste da urease

Esse teste é usado para identificar bactérias capazes de hidrolisar a ureia, por meio da enzima urease. É comumente usado para distinguir gênero Proteus de outras bactérias entéricas.

A hidrólise da ureia produz amônia como um de seus produtos. Esta base fraca aumenta o pH do meio acima de 8,4 e o indicador de pH (vermelho de fenol) muda de amarelo para rosa. Um exemplo de uma bactéria urease positiva é Proteus mirabilis.

Para que servem os testes bioquímicos?

Os testes bioquímicos em microbiologia são usados para diagnosticar doenças causadas por micróbios e monitorar os tratamentos administrados para combatê-las. Além disso, eles são usados para o rastreamento de doenças infecciosas e para seu prognóstico.

A identificação bioquímica de microrganismos oferece uma ideia do que esses microrganismos são capazes de fazer, sendo possível a discriminação de diferentes cepas de uma mesma espécie por perfis bioquímicos específicos.

As diferenças nas atividades enzimáticas específicas informam a ecologia, fisiologia ou habitat natural do microrganismo, o que em alguns casos pode ser considerado uma informação importante.

Importância

As diferenças estruturais na forma, tamanho e disposição das bactérias pouco ajudam no processo de identificação, porque há muitas espécies de bactérias que são semelhantes em forma, tamanho e disposição.

Por esse motivo, a identificação de bactérias é basicamente baseada principalmente nas diferenças em suas atividades bioquímicas.

Cada espécie de bactéria tem um conjunto bem definido de atividades metabólicas diferentes de todas as outras espécies. Essas "impressões digitais" bioquímicas são propriedades controladas por enzimas bacterianas.

Assim, os exames bioquímicos são importantes, pois auxiliam o pesquisador a identificar corretamente os patógenos presentes em uma amostra e, dessa forma, poder indicar o tratamento adequado ao paciente.

Referências

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