Meios de cultura seletivos: base, sólido e líquido - Ciência - 2023


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Meios de cultura seletivos: base, sólido e líquido - Ciência
Meios de cultura seletivos: base, sólido e líquido - Ciência

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o meios de cultura seletivos são aqueles ágares e caldos que servem para o isolamento de um grupo definido de microrganismos, ao mesmo tempo que inibem o desenvolvimento de outros. São ideais para a semeadura de amostras polimicrobianas, permitindo a recuperação do patógeno procurado na microbiota acompanhante.

Existe uma grande variedade de meios seletivos, entre sólidos e líquidos. Alguns são destinados ao isolamento de bactérias Gram positivas, como Staphylococcus coagulase positiva, Lactobacillus, Bifidobacteria, etc.

Outros para a recuperação de patógenos Gram negativos, como espécies dos gêneros Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas, entre outros.

Assim como existem também os que favorecem o crescimento de fungos e leveduras, como espécies de Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatófitos, entre outros.


Deve-se notar que alguns meios enriquecidos não seletivos podem se tornar seletivos com a adição de antibióticos. Além disso, alguns meios de cultura podem ser seletivos e diferenciais ao mesmo tempo.

Por outro lado, existem meios de cultura líquidos seletivos; alguns podem servir como meio de enriquecimento, favorecendo a exacerbação de um grupo seletivo de bactérias, enquanto suprime o de outros.

Os meios de cultura seletivos são amplamente utilizados em laboratórios de microbiologia para a análise de vários tipos de amostras; bem como para o isolamento de uma grande variedade de microrganismos de interesse clínico, industrial, ambiental e alimentar.

Base

Os meios de cultura seletivos baseiam-se em conter substâncias nutritivas que favorecem o crescimento de uma determinada bactéria ou fungo ou de um determinado grupo destes, e ao mesmo tempo devem conter substâncias inibidoras que não permitam o desenvolvimento de outros microrganismos indesejáveis.


Dentre as substâncias nutritivas que podem conter estão: digestão pancreática de caseína, extrato de levedura, polipeptonas, entre outras.

Entre as substâncias inibidoras estão: antibióticos, sais biliares, verde brilhante, violeta cristal, fucsina básica, eosina, azul de metileno, desoxicolato de sódio, sulfito de sódio, monoleato de sorbitano, citrato de amônio, cetrimida, cloreto de lítio, telurito de potássio , verde malaquita, entre outros.

Às vezes, a mídia pode ser seletiva e diferencial. Da mesma forma, o grau de seletividade varia de um meio para outro.

Alguns são altamente seletivos, caracterizados por apresentarem condições extremas de hostilidade para a maioria dos microrganismos e onde apenas um pequeno número de espécies é capaz de suportar as condições presentes no ambiente e, portanto, crescer de forma satisfatória. Por exemplo, ágar TCBS e ágar MRS, entre outros.

Enquanto outros são moderadamente seletivos, ou seja, aqueles que inibem um grupo específico de microrganismos, como bactérias Gram positivas. Por outro lado, favorecem o crescimento de uma grande variedade de bactérias Gram negativas; por exemplo, ágar Mac Conkey.


Por fim, existem meios de cultura com baixo poder seletivo, ou seja, são aqueles que permitem o crescimento de uma grande variedade de bactérias entre Gram positivas e Gram negativas, assim como algumas leveduras, mas inibem apenas um pequeno grupo de microrganismos. Exemplo: ágar EMB.

Meios de cultura sólidos seletivos

Ágar Baird-Parker

Meio projetado para a detecção de estafilococos coagulase positiva (Staphylococcus aureus) Contém como substâncias inibitórias cloreto de lítio e telurito de potássio.

Agar BCYE ou Agar Tampado com Extrato de Carvão de Levedura

É um meio de cultura altamente enriquecido, especialmente para o isolamento de espécies de Legionella e Nocardia. Este meio torna-se seletivo com a adição de antimicrobianos, como polimixina B, vancomicina e anisomicina.

BHI ágar com antibióticos

O ágar BHI é originalmente um meio enriquecido, mas se forem adicionados cloranfenicol e cicloheximida, é ideal para o isolamento seletivo de fungos de interesse clínico.

Ágar BIGGYou ágar Nickerson

Meio seletivo e diferencial para o isolamento de espécies de Candida. Contém citrato de amônio, bismuto e sulfito de sódio, que atuam como inibidores do crescimento bacteriano.

Agar Bordet Gengou

Meio de cultura enriquecido e seletivo, especialmente para o isolamento de Bordetella pertussis Y Bordetella parapertussis. Ele contém cefalexina para inibir a flora que o acompanha.

Ágar extravagante com sangue

Meio utilizado para o isolamento do gênero Campylobacter. Contém cefoperazona, vancomicina e anfotericina B para inibir o crescimento de bactérias Gram negativas, Gram positivas e fungos.

Ágar Campylobacter Butzler

Meio especial para o isolamento de espécies do gênero Campylobacter. É complementado com sangue de cavalo, entre outros nutrientes. Também contém várias substâncias inibidoras, como novobiocina, colistina, cefazolina, bacitracina e cicloheximida.

Agar Campylobacter Skirrow

Meio seletivo para o isolamento de espécies de Campylobacter. Contém sangue de cavalo e outros nutrientes. Como substâncias inibidoras, contém vancomicina, polimixina B e trimetoprima.

Ágar CCF ou ágar frutose, cicloserina, cefoxitina

Como o próprio nome indica, contém cicloserina e cefoxitina como substâncias inibidoras e é usado para o isolamento de Clostridium diffcile em amostras de fezes, entre outras amostras intestinais.

Ágar cetrimida

Meio seletivo, projetado para o isolamento de Pseudomonas aeruginosa, favorecendo a produção de pigmentos. Cetrimida (brometo de cetiltrimetilamônio) é a substância que inibe o crescimento de bactérias diferentesP. aeruginosa.

Ágar de chocolate com isovitalex e vancomicina

Este meio é originalmente muito enriquecido. A adição de vancomicina é útil para o isolamento seletivo de cepas de Neisseria gonorrhoeae Y N. meningitidis.

Ágar CIN ou ágar cefsulodina, irgasan, novobiocina

É um meio de cultura moderadamente seletivo para o isolamento de espécies de Yersinia.

Ágar CNA (colistina, ácido nalidíxico)

É um meio seletivo especial para o isolamento de bactérias Gram positivas como Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus e leveduras, mas inibe o desenvolvimento de bactérias Gram negativas como Pseudomonas e espécies da família Enterobacteriaceae.

Ágar czapek

Meio desenvolvido para o cultivo de bactérias e fungos saprofíticos. Este meio contém nitrogênio inorgânico. Por esse motivo, esse meio é considerado seletivo, uma vez que apenas podem se desenvolver microrganismos capazes de utilizar compostos inorgânicos como única fonte de nitrogênio.

Ágar EMB

Meio ligeiramente seletivo e diferencial, usado para o isolamento de Enterobacteriaceae. Escherichia coli é especialmente detectado neste meio pela cor preto-esverdeada brilhante de suas colônias. O grau de seletividade que possui é devido à presença de corantes de anilina (eosina e azul de metileno).

Ágar Endo

Meio minimamente seletivo e diferencial, utilizado para o isolamento e diferenciação de bastonetes Gram negativos fermentadores e não fermentadores pertencentes à família Enterobacteriaceae e a outras famílias.

O sulfito de sódio e a fucsina básica inibem a maioria das bactérias Gram positivas. Escherichia coli neste meio, produz colônias vermelhas escuras características com um brilho metálico esverdeado iridescente.

Ágar Hektoen

Meio seletivo e diferencial para o isolamento de bactérias enteropatogênicas dos gêneros Shigella e Salmonella. Como substância inibidora, contém sais biliares, suprimindo o desenvolvimento de bactérias Gram positivas e algumas bactérias Gram negativas.

Ágar Löwenstein-Jensen

Meio especialmente desenvolvido para o isolamento e desenvolvimento de bactérias do gênero Mycobacterium, especialmente da espécie tuberculose, entre outras.

O meio contém verde malaquita; esta substância inibe a flora Gram positiva e Gram negativa que tem sido capaz de resistir à desinfecção prévia da amostra. Ele também contém glicerina que estimula o crescimento de M. tuberculosis, mas inibe o desenvolvimento de M. bovis e outros microorganismos.

Ágar Mac Conkey

É um meio seletivo e diferencial. É usado para o isolamento de bastonetes Gram negativos de lactose não fastidiosos, fermentadores e não fermentadores.

Seu caráter seletivo é proporcionado pela presença de sais biliares e cristal violeta. Essas substâncias inibem o crescimento de bactérias Gram-positivas e de alguns bastonetes Gram-negativos fastidiosos.

Ágar manitol salgado

Agar seletivo e diferencial para o isolamento de Staphylococcus aureus. Este meio possui uma alta concentração de cloreto de sódio que inibe o crescimento da maioria das bactérias.

Ágar SS

Meio moderadamente seletivo e diferencial para o isolamento dos gêneros Salmonella e Shigella. O meio contém substâncias inibidoras, como sais biliares, citrato de sódio e verde brilhante. Essas substâncias suprimem o crescimento de bactérias Gram positivas, certas bactérias Gram negativas e alguns coliformes.

Agar Regan Lowe

Agar seletivo para o isolamento deBordetella pertussis. O meio contém carvão, cefalexina e anfotericina B como substâncias inibidoras.

Ágar SABHI

Meio seletivo para o isolamento de fungos patogênicos, como dermatófitos, Blastomyces dermatitidis e Histoplasma capsulatum. Contém cloranfenicol.

Ágar sangue de cavalo com bacitracina

Meio especial para o isolamento de Haemophilus influenzae. A bacitracina inibe a flora acompanhante.

Ágar de carvão de sangue de cavalo

Meio seletivo útil para recuperar cepas de Bordetella pertussis Y B. parapertussis a partir de amostras clínicas. Ele contém cefalexina para inibir a flora que o acompanha.

Agar Sangue Canamicina-Vancomicina (KV)

Meio seletivo, especial para o isolamento de bactérias anaeróbias, como Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium e Veillonella.

Ágar Bismuto Sulfito

Meio seletivo para o isolamento de Salmonella enterica subgrupo enterica sorotipo Typhi. Este meio contém sulfito de bismuto verde brilhante para inibir o crescimento de microrganismos Gram positivos e certas bactérias Gram negativas.

Ágar TCBS (tiossulfato, citrato, sais biliares)

Meio altamente seletivo para o isolamento de espécies do gênero Vibrio. Ele contém citrato de sódio, bile de boi e um pH alcalino que inibe a flora que o acompanha.

Agar Thayer-Martin

Meio altamente nutritivo e seletivo para o isolamento deNeisseria meningitidis e Neisseria gonorrhoeae. A flora acompanhante é inibida pela presença de vancomicina, colistina e nistatina.

Ágar verde brilhante

Meio seletivo para o isolamento de cepas do gênero Salmonella. Como o próprio nome sugere, ele contém verde brilhante como uma substância inibidora. Isso evita o crescimento de bactérias Gram positivas e um grande número de microorganismos Gram negativos.

Ágar Vogel-Johnson

É um meio de cultura seletivo e diferencial, formulado para o isolamento deStaphylococcus aureus e inibe o crescimento de bactérias Gram negativas e até mesmo algumas Gram positivas. As substâncias inibidoras são telurito de potássio, cloreto de lítio e glicina.

Ágar XLD

É um meio seletivo e diferencial para o isolamento de enteropatógenos de Salmonella e Shigella. O desoxicolato de sódio confere o caráter seletivo ao meio.

CHROMagar (Candida Medium)

É um meio seletivo e diferencial para auxiliar no isolamento e identificação de espécies de Candida. O meio contém cloranfenicol para inibir o crescimento de bactérias.

Middle Ellinghausen McCulough Johnson e Harris (EMJH)

Meio seletivo para o cultivo de Leptospiras. Ele contém polissorbato 80, que inibe o crescimento da maioria das bactérias.

Meio de cultura líquido seletivo

BHI Caldo NaCL 6,5%

Caldo seletivo para recuperação de Enterococcus. A alta concentração de cloreto de sódio inibe o crescimento da microbiota acompanhante.

Caldo CE

Caldo seletivo para recuperação de coliformes totais e fecais. Ele contém sais biliares que inibem o crescimento de outros microrganismos.

Caldo GN

Caldo seletivo para recuperação de Salmonella e Shigella. Contém citrato de sódio e desoxicolato de sódio, que inibem bactérias Gram positivas e coliformes.

Caldo Rappaport-Vassiliadis

É um meio de enriquecimento seletivo para espécies de Salmonella. Contém verde malaquita como substância inibidora.

Caldo de selenita

É um meio de cultura seletivo, útil para o enriquecimento de amostras onde se suspeite a presença de bactérias enteropatogênicas do gênero Salmonella.

Como o próprio nome sugere, ele contém selenito de sódio como uma substância inibidora, suprimindo o crescimento de bactérias Gram positivas e da maioria das bactérias no trato gastrointestinal.

Caldo de tetrationato

Caldo seletivo para enriquecimento e recuperação de cepas do gênero Salmonella.

O tetrationato formado pela reação gerada entre o tiossulfato de sódio e a solução iodada presente no meio inibe o crescimento de coliformes e favorece o desenvolvimento de bactérias que contêm a enzima tetrationato redutase (Salmonella).

Ele também contém sais biliares e algumas variedades incluem verde brilhante; ambas as substâncias inibem a maioria das bactérias Gram positivas e algumas bactérias Gram negativas (coliformes).

Caldo de tioglicolato campy

Caldo especial para promover o desenvolvimento de C. jejuni subsp jejuni. Contém Anfotericina B, Cefalotina, Polimixina B, Trimetoprima e Vancomicina.

Caldo Todd-Hewitt com sangue e antibióticos

Serve para enriquecer as amostras e favorecer o desenvolvimento de Streptococcus agalactiae de secreções vaginais. Como substâncias inibidoras, contém ácido nalidíxico e gentamicina ou colistina.

Referências

  1. Meios de cultura de microbiologia clínica (ano letivo 2012-2013). Disponível em: asignatura.us.es
  2. Laboratórios BD. Agar Campylobacter Skirrow e Agar Butzler Campylobacter. 2013. Disponível em: bd.com
  3. Laboratórios IVD. Löwenstein-Jensen. 2011. Disponível em: bio-rad.com
  4. Neogen Laboratories. Caldo GN (Hajna). Disponível em: foodsafety.neogen.com
  5. Laboratórios BD. CHROMagar. Candida Medium 2014. Disponível em: bd.com
  6. Laboratórios BD. Caldo Rappaport Vassiliadis. 2003. Disponível em: bd.com
  7. Portal da Web Lifeder.com. Disponível em: Lifeder.com
  8. Laboratórios BD. Leptospira Medium Base EMJH2011 Disponível em: http://legacy.bd.com
  9. Koneman E, Allen S, Janda W., Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico. 5ª ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.
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